ABSTRACT
En este trabajo se presentan los resultados de las pruebas biológicas realizadas para evaluar la funcionalidad y desempeño del suero fetal bovino de fabricación nacional sobre el crecimiento de cultivos celulares con diversos requerimientos nutricionales. Realizando ensayos de eficiencia de clonaje, eficiencia de plaqueo y curvas de crecimiento sobre líneas celulares y fibroblastos, se demostró que el suero de fabricación nacional puede ser empleado en el cultivo continuo de las líneas A549, PC-3, HT-29, MDA-MB231 con un buen desempeño; y en fibroblastos, las células LSPG8G, MDBK e hibridomas puede ser usado siempre y cuando se emplee al 10% y se realicen cambios de medio al menos cada 48 horas. En ninguno de los ensayos se observó un efecto tóxico o adverso sobre el crecimiento de las células empleadas, aunque en algunos casos se observó una menor funcionalidad frente al crecimiento celular comparando los resultados con otros sueros calificados. Los resultados obtenidos destacan la utilidad del SFB nacional en la aplicación para la propagación de células poco exigentes en ensayos de corta duración, así como en procedimientos transitorios tales como la inactivación de la actividad enzimática de la tripsina y criopreservación.
In this work, we present the results of biological tests performed to evaluate the functionality and performance of fetal bovine serum produced in Colombia, on the growth of cell cultures with different nutritional requirements. Performing cloning efficiency tests, plating efficiency and growth curves of cell lines and fibroblasts, showed that the Colombian serum can be used with a good performance, in continuous culture of cell lines A549, PC-3, HT-29, MDA-MB231, in fibroblasts LSPG8G cells, MDBK and hybridomes can be used in a minimum concentration of 10% and medium every 48 hours. It should be noted that none of the treatments showed a toxic or adverse effect on the growth of the cells used, although in some cases had less functionality compared to cell growth by comparing the results with other qualified serum. Therefore, the Colombian showed to be suitable for the propagation of short-term culture cells, as well as transitional procedures such as trypsin inactivation, and cryopreservation.
ABSTRACT
The composition of the cytotoxic hexane fraction of the Croton stipuliformis bark was studied by meansof a gas chromatography coupled to a mass spectrometry; sesquiterpenes and sterols were characterized as the main constituents. Along with these compounds, three labdane and seco-labdane diterpenoids, 8(17),12E,14-labdatrien-18-oic acid [3], 12E-3,4-seco-labda-4(18),8(17),12,14-tetraen-3-oic acid [2],and its methyl ester [1] were isolated from this fraction through preparative HPLC, and their structures were elucidated by HR-FABMS, 1D and 2D NMR analyses. Additionally, the cytotoxic activity of these three compounds against human tumor cell lines HEp-2, HT-29, MKN-45, MCF-7, and HeLa was assessed. The three compounds showed a non-specific and moderate cytotoxicity against the above mentioned cell lines.
La composición de la fracción hexánica de la corteza de Croton stipuliformis se estudió por cromatografía de gases acoplada a espectrometría de masas; se caracterizaron los sesquiterpenos y esteroles como los principales constituyentes. Adicionalmente a estos compuestos, tres diterpenoides labdanos y seco-labdanos, el ácido 8(17),12E,14-labdatrien-18-oico [3], el ácido 12E-3,4-seco-labda-4(18),8(17),12,14-tetraen-3-oico [2] y su ester metílico [1] se aislaron de esta fracción por HPLC preparativa y sus estructuras seelucidaron con base en los análisis por HRFABMS, espectroscopía de RMN mono y bidimensional. Adicionalmente, se determinó la actividad citotóxica de estos tres compuestos frente a las líneas celulares de tumores humanos HEp-2, HT-29, MKN-45, MCF-7 y HeLa. Todos los compuestos mostraron unacitotoxidad moderada y no específica frente a las líneas celulares mencionadas anteriormente.